SRM 2366a 巨細(xì)胞病毒DNA（用于DNA測量）標(biāo)準(zhǔn)品旨在用于為每個(gè)樣本體積中巨細(xì)胞病毒 (CMV) 可擴(kuò)增基因組的拷貝數(shù)指定一個(gè)值。 當(dāng)用于分配時(shí)，實(shí)際的 CMV 校準(zhǔn)材料 NIST SRM 2366a 可以提供對國際單位制 (SI) 組織或流體（如血漿）中 CMV 病毒載量測量結(jié)果的可追溯性。

一個(gè)單元的 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) NIST SRM 2366a - 巨細(xì)胞病毒DNA 由一個(gè)無菌的 0.5 mL 全氟烷氧基 (PFA) 含氟聚合物小瓶組成，其中包含大約 150 μL 提取的 DNA，溶解在 TE 緩沖液，pH 8.0 中。 TE 緩沖液由 10 mmol/L 2-氨基-2-(羥甲基)-1,3-丙二醇 (Tris) 和 1 mmol/L 乙二胺四乙酸 (EDTA) 四鈉鹽在去離子水中組成。 CMV DNA的形式是細(xì)菌人工染色體——稱為CMV TowneΔ147 BAC——包含Towne菌株CMV的基因組[1,2]。

表 1. SRM 2366a 的 CMV 認(rèn)證拷貝值

這些認(rèn)證值是根據(jù)使用液滴數(shù)字 (ddPCR) 系統(tǒng) [3] 和平均液滴體積的直接測量進(jìn)行的五次聚合酶鏈反應(yīng) (PCR) 測定的一致結(jié)果確定的。使用高斯隨機(jī)效應(yīng)模型 [4] 計(jì)算認(rèn)證值及其不確定性。 NIST 認(rèn)證值是 NIST 對其準(zhǔn)確性有最高置信度的值，因?yàn)樗幸阎蚩梢傻钠顏碓炊家驯徽{(diào)查或考慮 [5]。

不確定性：

該材料中分析物的真實(shí)值預(yù)計(jì)在給定的概率區(qū)間內(nèi)，置信水平約為 95%。出于不確定性傳播的目的，請使用規(guī)定的 u(X) 或 CV，以最適合您的目的為準(zhǔn)；這些值與 60 個(gè)自由度相關(guān)。

可追溯性：

認(rèn)證值可追溯至每體積的拷貝數(shù)，表示為每微升溶液中可擴(kuò)增的 CMV 實(shí)體數(shù)，通過身份確認(rèn)、ddPCR 計(jì)數(shù)測量、計(jì)數(shù)到實(shí)體的 Poisson 端點(diǎn)轉(zhuǎn)換的有效性，用于數(shù)字 PCR 端點(diǎn)[6]，以及在 NIST 進(jìn)行的校準(zhǔn)體積測量。計(jì)量溯源性是針對體積的 SI 單位。

處理、儲存和使用說明

處理： SRM 2366a 巨細(xì)胞病毒DNA（用于DNA測量）標(biāo)準(zhǔn)品是一種病毒和細(xì)菌 DNA 源材料。 由于對提取的 DNA 的感染狀態(tài)沒有達(dá)成共識，請將 SRM 2366a 作為生物安全處理能夠傳播傳染病的 1 級材料 [7]。 SRM 2366a 和衍生解決方案應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)?、州和?lián)邦法規(guī)進(jìn)行處理。

儲存：NIST SRM 2366a 小瓶應(yīng)儲存在 2 °C 至 8 °C 之間的黑暗中。 不要凍結(jié)。

使用：在取出樣品等分試樣進(jìn)行分析之前，小瓶應(yīng)通過倒置混合并離心，而無需打開小瓶蓋。 為使認(rèn)證值有效，打開小瓶后應(yīng)立即取出材料并立即處理。 這些材料可以適當(dāng)稀釋，但必須立即使用。 認(rèn)證值不適用于重新封蓋的小瓶中剩余的任何材料。 不要將任何 DNA 溶液直接暴露在陽光下。

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